Hifair® Super Reverse Transcriptase（200 U/μL）
产品名称： Hifair® Super Reverse Transcriptase（200 U/μL）
英文名称： Hifair® Super Reverse Transcriptase（200 U/μL）
产品编号： 14612ES92
产品价格： 1435.00
产品产地： Yeasen
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2024-12-10T11:18:52
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 10000 U | 1435.0 |
| 50000 U | 4635.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
Hifair® Super Reverse Transcriptase是通过ZymeEditor定向进化平台对M-MLV进行定向改造获得的新一代逆转录酶，该酶缺乏RNase H活性，其热稳定性大幅度提高，可耐受高达70℃的反应温度，非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的高效逆转录。
产品信息
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货号 |
14612ES92 / 14612ES93 |
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规格 |
10,000 U / 50,000 U |
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单位定义 |
以Poly(A) .Oligo(dT)为模板-引物，在37℃，10 min内，将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。 |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
14612ES92 |
14612ES93 |
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14612 |
Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
产品应用
本产品适用于RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP、RNA-seq、cDNA合成等实验，逆转录反应温度最高可达70℃。
储存条件
-25~-15℃保存，有效期18个月。
使用说明
第一链cDNA合成操作步骤
1. RNA变性（此步为可选步骤，RNA变性有助于打开二级结构，可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。）
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组分 |
使用量 |
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RNase free ddH2O |
to 13 μL |
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Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers (2 μM) |
1 μL or 1 μL or 1 μL |
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模板RNA |
Total RNA: 10 pg - 5 μg或mRNA: 10 pg - 500 ng |
65℃加热5 min，迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后，加入下表中的逆转录反应液，并轻轻吹打混匀。
2. 逆转录反应体系配制（20 μL体系）
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组分 |
使用量 |
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上一步的反应液 |
13 μL |
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5×reaction Buffer |
4 μL |
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dNTP Mix (10 mM) |
1 μL |
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Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) |
1 μL |
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RNase inhibitor (40 U/µL) |
1 μL |
3. 逆转录程序设置
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温度 |
时间 |
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25℃* |
5 min |
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50-70℃ |
15-30 min |
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85℃** |
5 min |
*当使用Random Primers时，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略。
**85℃加热5 min，目的是使逆转录酶失活，可根据实际情况进行设置。
逆转录产物可立即用于后续PCR或qPCR反应，也可-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。
注意事项
1. 请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
2. 所有操作均应在冰上进行，防止RNA降解。
3. 为保证高效率逆转录，建议使用高质量的RNA样本。
4. 本产品仅用作科研用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240522